仔猪腹泻现象在猪场时常发生，其主要传染性因素的病原分为病毒和细菌两类。猪流行性腹泻病毒是最主要的病毒病原，而大肠杆菌则是重要的细菌病原。当猪流行性腹泻病毒和大肠杆菌混合感染时，会给猪场导致非常严重的经济损失。本文通过一例仔猪猪流行性腹泻病毒和大肠杆菌混合感染的病例，从发病情况、剖检变化、实验室诊断、药敏试验、防治等方面做阐述，旨在为临床上防控这两种疾病提供参考。
引起仔猪腹泻的传染性因素有很多，大致上可以分为病毒性病原和细菌性病原两类。常见的病毒性病原最重要的包含猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒（PRoV）、猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病毒（PRV）等，尤其肠道病毒感染仔猪后，临床症状表现相似、病理变化差别不大，会造成误诊，耽误疾病的及时防治。在这些肠道病毒中，PEDV对哺乳仔猪的危害最重，发病率可达100%，病死率30%～80%。患病猪是PEDV的主要传染源，此外，携带PEDV的野猪是病毒的储存宿主，对该病的流行和传播具备极其重大作用。2010年起，我国的许多猪场大规模暴发PED，初生仔猪死亡率达90%以上，原来的免疫方式和疫苗不能控制PED发生，原因主要在于PEDV发生了重要变异。2013年5月，美国首次发现PED，传播力强，致使美国31个州的商品猪存栏量在18个月内损失10%。
细菌性病原主要为大肠杆菌（i），随着养猪业规模迅速扩大，仔猪黄痢和仔猪白痢在临床上最常发生，其发病率和死亡率在仔猪疾病中占据首位，极大阻碍了养猪业的健康发展。由于E.coli血清型复杂，易产生耐药菌株，如何有效地防治该病正面临着巨大的挑战。
PEDV与E.coli是目前引起仔猪腹泻最主要的病原，当仔猪同时感染PEDV与E.coli时，会给养猪场导致非常严重的经济损失。现将一例仔猪PEDV与E.coli混合感染的情况报道如下。
齐齐哈尔市泰来县某一体化养猪场共养殖生猪1300多头，2022年4月下旬，母猪与新生仔猪陆续发病，母猪主要体现为呕吐、喷射状水样腹泻，精神情况良好，食欲正常，持续1周后康复；哺乳仔猪出生后第2天，开始持续水样腹泻，后变为白色稀便，精神沉郁，食欲减退，3～5d后陆续出现死亡。畜主前期用过头孢噻呋钠、庆大霉素、环丙沙星及补液盐等药物，效果不佳，至来就诊咨询时，仔猪已陆续死亡25头。
对刚死亡的2头小猪进行剖检，肝脏局部坏死（见图1）；肾脏有密密麻麻点状出血（见图2）；脾脏 边缘出血、梗死（见图3）；小肠壁变薄，肠系膜出血，肠内充满黄色液体（见图4）。
1）病料处理 取脾脏、肾脏、脑、淋巴结等组织及肠内容物约2.0g，放于研磨中，剪碎，加入1mL生理盐水研磨，磨碎后放入EP管中，6000rpm离心3min。
2）RNA提取 取上清液按照相关说明进行DNA和RNA的提取，获得模板DNA和模板RNA。
3）PCR扩增 设计好程序，在PCR扩增仪上进行TGEV、PEDV、PRoV、CSFV、PRRSV、PRV的扩增。
4）电泳 取PCR或RT-PCR产物点样于琼脂糖凝胶孔中，以110V电压于TAE电泳缓冲液中进行16min的电泳，在凝胶成像系统上观察结果。第2泳道，在508bP左右处出现亮带，说明猪流行性腹泻病毒阳性，其余病毒阴性（见图5）。
无菌取仔猪的肝脏、脾脏组织接种于琼脂培养基，通过麦康凯和伊红美蓝鉴别培养基、革兰氏染色及菌体形态，确定从仔猪体内分离的菌体为大肠杆菌。
将分离的菌均匀涂抹到营养琼脂平板上，选择6种常用抗菌药（头孢噻呋钠、庆大霉素、环丙沙星、多西环素、磺胺间甲氧嘧啶、卡那霉素）均匀放置于平板上，培养过夜。结果显示，该菌对卡那霉素中度敏感，对其它抗生素不敏感。
将病猪转至隔离间，猪舍全面消毒，可选择次氯酸成分的消毒水（84）或者是3%的氢氧化钠溶液，对分娩舍清扫干净，用百毒杀进行彻底消毒后将临产母猪赶入待分娩。禁止工作人员来回窜舍，防止交叉传播病菌。
不同阶段的猪要进行分开饲养，哺乳仔猪和妊娠母猪更要进行单独饲养，避免PEDV的传播和交叉感染，饲喂全价料保障猪的生长发育，补给微量元素和维生素。
丁胺卡那霉素肌注，发病仔猪按10mg/kg体重给药，1次/d；白细胞干扰素2000～3000IU，皮下注射，1次/d，同时口服补液盐，饲喂乳酸杆菌，连用5d；全群用活性炭拌料，每100kg饲料加0.5kg活性炭，连喂3~5d。选用以黄连、黄芩为主药的多种中药方剂水煎服用。
PEDV主要侵染初生仔猪并致病，目前针对仔猪发病无有效的免疫治疗方法，必须依赖母猪初乳获得被动免疫进行疫病防控。因此，一定要做好母猪的PED免疫。灭活疫苗免疫母猪可以产生较好的免疫效果，但肌肉或后海穴免疫途径主要产生执行体液免疫功能的IgG，执行肠道黏膜保护的IgA产生有限，因此保护不了仔猪感染PEDV，经典毒株和经典毒株CV777重组易产生新型变异株，且存在生物安全风险；弱毒疫苗相对于灭活苗具有接种量少、抗体产生速度快等优势，但筛选疫苗毒株的周期过长；基因工程疫苗中的重组病毒有几率存在过度致弱的问题。因此就需要对包括母猪孕期免疫机理和PEDV免疫防控的诸多方面加强研究，为更完善的PEDV免疫防控提供理论技术支撑。
由于一些猪场滥用抗生素，使得大肠杆菌耐药质粒转移扩散产生了耐药性，对抗生素的敏感性不断下降，因此，合理选用抗生素是非常有必要的；在饲料禁抗的大背景下，使用一些益生菌或中药添加剂能够更好的降低仔猪腹泻发病率。饲料中添加益生菌可有效地调节肠道菌群。有试验证明，在仔猪出生后未吮吸母乳前饲喂乳酸杆菌能大幅度降低腹泻死亡率。在生产中，可选择“小柴胡散+阿莫西林”和“双黄连+阿莫西林”来驱除寒湿和热湿。
7d后，笔者电话回访，主诉猪群基本回到正常状态。随着集约化养殖业的持续不断的发展，仔猪腹泻现象时常发生，需要格外的重视，及时查明病因，精准治疗，除上面提到的方案外，还能采用返饲的方式，将妊娠母猪暴露于病毒污染的粪便或者肠内容物，激发母猪产生乳汁免疫力；给新生仔猪灌服抗PED卵黄抗体等。预防仔猪腹泻，最重要的是要做好妊娠母猪的疫苗免疫，尤其是PEDV和i疫苗的合理接种，它必然的联系到初乳中的抗体水平，间接影响猪场的经济效益。
作者：陈亮，张蕾，沈思思，兰世捷，苗艳，冯万宇，李丹，钟鹏，刘博超，吴宪，于辰龙/黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院
